1、准备原料：准备好黄豆芽、白糖、琼脂、羊肚菌基脚、水等原料，其中黄豆芽需煮成汁水。
2、操作过程：将原料混匀并加水至含水量为65%，然后装瓶并塞上棉塞。
3、灭菌方式：羊肚菌需进行高温灭菌，然后再进行接种。
4、接种培养：接种前需对接种箱消毒，一般每支母种可接种原种5-10瓶，接种后置于18-22℃环境下避光培养。
一、羊肚菌菌种的制作方法
1、准备原料
想要制作羊肚菌菌种，需要准备500克黄豆芽、白糖20克、琼脂20克、羊肚菌基脚50克、水1升，注意一定要将黄豆芽煮成汁水，加快羊肚菌菌种的繁殖速度。
2、操作过程
羊肚菌菌种的材料准备好后，将其混合均匀，并加入清水，使含水量达到65%时装瓶，并且装瓶要求松紧一致，洗去瓶壁内外沾染的原料，然后塞上棉塞，等待羊肚菌发酵。
3、灭菌方式
羊肚菌菌种要经过灭菌后才可以使用，首先将其放在0.68千克压力下维持1小时，然后转入常压100℃温度下保持6-8小时，注意灭菌时间不可过长或者压力过高，否则会破坏羊肚菌菌种中的养分。
4、接种培养
接种羊肚菌时要对接种箱进行消毒，每支母种可以接种原种5-10瓶，接种后要将其放在18-22℃温度下避光培养，大约10天后羊肚菌就会长满菌丝。
二、羊肚菌的种植注意事项
1、合适的光照
合适的光照条件对于羊肚菌来说非常重要，由于羊肚菌的生长方向不仅会朝着光照的方向生长，而且光照强度的强弱也决定羊肚菌的上色程度。所以在种植羊肚菌期间为了更好的促进子实体的形成，需要确保有适当的散射光线。
2、降低二氧化碳的含量
在种植羊肚菌时，要注意降低二氧化碳的含量，过多二氧化碳会降低羊肚菌的生长速度，严重时还会导致羊肚菌没有办法正常生长，并出现生长畸形、腐烂的情况。
3、良好的通风
（1）想提高羊肚菌出菇率就需要确保合理的通风，就算温度比较低，也需要有1个小时的通风时间。
（2）给羊肚菌通风时需要注意，不能通大风和猛风，风量要柔和。
4、适当留草
由于羊肚菌和杂草有着共同生长的关系，杂草有为子实体遮阴和促进生长的作用，如果除掉苗床的杂草可能会破坏土壤内的菌丝，对羊肚菌的生长造成一定的影响，所以在种植羊肚菌时不可除掉苗床的杂草。
5、视实际情况进行采收
（1）由于大部分的羊肚菌并不会同一时间全部成熟，所以要采收菌盖已经完全伸展并出现了羊肚形状的成熟羊肚菌，不能采收未成熟的羊肚菌。
（2）为了不影响羊肚菌正常的生长发育，在采收时需要注意，不要伤到周围还没有成熟的羊肚菌。
